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【佑安學術】獨具特色,北京佑安醫(yī)院任鋒團隊多項CRISPR研究結果在國內學術會議匯報和交流

作者:肝病研究所 張向穎 瀏覽次數:
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成簇規(guī)律間隔短回文重復序列(CRISPR)/CRISPR相關系統(Cas)作為一種新型的核酸檢測技術,因其具有高靈敏度和高特異性的獨特特性,在過去的十年中受到了廣泛關注并取得了很大進展。任鋒教授科研團隊近年來利用CRISPR新技術致力于傳染病相關病原體核酸檢測新方法的建立與臨床應用,研究成果相繼在國內學術會議中進行匯報和交流。

任鋒教授2021級博士研究生田原,在2023年4月成都舉辦的“第三屆中華分子診斷大會”優(yōu)秀論文評選中榮獲“三等獎”,論文的題目是“基于PCR-CRISPR/Cas13a技術檢測乙型肝炎病毒共價閉合環(huán)狀DNA方法的建立和臨床驗證”。研究通過選定HBV cccDNA跨缺口區(qū)作為擴增靶序列,設計特異性PCR引物、熒光定量PCR探針以及crRNA,建立了基于CRISPR-Cas13a技術的HBV cccDNA檢測新方法。本研究使用qPCR、PCR-CRISPR、RCA-qPCR、RCA-PCR-CRISPR和ddPCR五種方法對40例HBV相關病人的肝組織和24例HBV相關病人的血漿、全血和PBMC進行了檢測。結果表明,RCA-PCR-CRISPR方法對肝組織的檢出率為72.5%,高于其他檢測方法。本研究建立了基于CRISPR/Cas13a的新型檢測方法,可對HBV cccDNA進行高靈敏度和特異性檢測,為準確檢測HBV感染、抗病毒治療評估、治療終點的確定以及調整治療方案提供了有力的技術支撐。


任鋒教授2022級博士研究生范子豪,在2023年3月重慶舉辦的“第四屆全國臨床檢驗診斷學和醫(yī)學檢驗技術研究生學術論壇”優(yōu)秀論文評選中榮獲“二等獎”,論文的題目是“CRISPR/Cas13a技術助力乙型肝炎低病毒血癥患者HBV DNA快速便捷檢測”。該研究利用CRISPR/Cas13a檢測新技術,聯合等溫擴增技術(RAA),建立了基于RAA-CRISPR/ Cas13a的HBV DNA快速、便攜檢測試紙條。這種快速便攜的HBV DNA檢測試紙條將有望迅速擴大HBV感染的診斷篩查能力和覆蓋面積,為HBV感染者特別是HBV低病毒血癥患者(LLV)的HBV DNA檢測提供了一種可視化的、快速檢測的替代方案。這將簡化HBV感染患者抗病毒治療效果的驗證過程,有助于解決HBV感染這一全球公共衛(wèi)生問題。


任鋒教授2020級碩士研究生曹亞玲,于2023年6月在青島參加了由中華醫(yī)學會、中華醫(yī)學會肝病學分會主辦的“第六次全國肝病相關感染學術會議”,并在大會中匯報“基于CRISPR/Cas13a技術的耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌快速檢測新方法的建立及評價”相關研究。該研究利用CRISPR/Cas13a檢測新技術,聯合聚合酶鏈式反應(PCR)、等溫擴增技術(RAA),建立了基于PCR/RAA-CRISPR/ Cas13a檢測耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CRKP)的方法。通過結合橫向側流試紙條技術實現結果的可視化。該方法使用PCR/RAA-CRISPR檢測51株臨床樣本,CRKP檢出率可達到92.16%,這有助于在小型實驗室開展CRKP的檢測工作,在耐藥監(jiān)測、感染控制以及臨床治療指導方面有廣泛的應用前景。

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CRISPR新技術被《Nature》認為是2022年7大“顛覆性”技術之一?;贑RISPR技術可實現快速、精確、便攜式的核酸診斷,其有望成為下一代核酸檢測新技術,尤其是在感染性疾病的診斷上有著極佳的發(fā)展前景。隨著國內外CRISPR/Cas相關分子診斷技術不斷發(fā)展和優(yōu)化,其應用場景將被不斷拓展,有望成為新一代通用型、平臺型的分子診斷技術。