近期，北京佑安醫(yī)院任鋒教授科研團(tuán)隊(duì)在國(guó)際期刊《Cell Death & Disease》（IF=8.1）發(fā)表了題為“The cytoplasmic-nuclear transport of DDX3X promotes immune-mediated liver injury in mice regulated by endoplasmic reticulum stress.” 的學(xué)術(shù)論文。該團(tuán)隊(duì)研究表明，在免疫介導(dǎo)的肝損傷過(guò)程中，DDX3X胞質(zhì)到胞核的易位通過(guò)激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激-CHOP通路加重了肝損傷。這些新發(fā)現(xiàn)提示DDX3X是肝臟穩(wěn)態(tài)的潛在調(diào)節(jié)因子，是臨床治療免疫介導(dǎo)性肝損傷的一個(gè)有希望的靶點(diǎn)。北京佑安醫(yī)院博士研究生范子豪、研究實(shí)習(xí)員徐玲和博士后高耀為本研究的共同第一作者，任鋒教授和劉梅教授為共同通訊作者。

肝衰竭是一種由肝細(xì)胞凋亡和出血性壞死引起的臨床綜合征，多種研究已經(jīng)證實(shí)免疫介導(dǎo)的肝損傷在這種嚴(yán)重的進(jìn)行性疾病中起著核心作用。既往研究表明，刀豆蛋白A（ConA）誘導(dǎo)小鼠免疫介導(dǎo)的肝損傷可觸發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激并激活未折疊蛋白反應(yīng)。DDX3X在應(yīng)激條件下作為一種類似變阻器的蛋白在一定程度上對(duì)細(xì)胞生存或死亡起到調(diào)節(jié)作用。因此，本研究探討DDX3X在免疫介導(dǎo)的肝損傷中的作用，并證實(shí)DDX3X通過(guò)調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡來(lái)促進(jìn)小鼠免疫介導(dǎo)的肝損傷。

研究使用ConA誘導(dǎo)小鼠免疫性肝損傷，采用DDX3X肝細(xì)胞特異性敲除（DDX3X ΔHep）和對(duì)照（DDX3X fl/fl）小鼠研究DDX3X在肝損傷中的作用，并使用4-PBA藥物對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激進(jìn)行干預(yù)。結(jié)果表明，在 Con A 誘導(dǎo)肝損傷中 DDX3X 的表達(dá)水平升高，并伴隨著該蛋白從細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核的易位。同時(shí)，DDX3X肝臟特異性缺乏可改善小鼠肝損傷并減輕肝組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。

為了進(jìn)一步研究 DDX3X 介導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的確切機(jī)制，該研究在不同的時(shí)間點(diǎn)使用內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)劑TM（Tunicamycin，衣霉素）在體內(nèi)外誘導(dǎo)小鼠肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激模型。在體內(nèi)和體外，隨著內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的逐漸延長(zhǎng)肝細(xì)胞DDX3X表達(dá)增加，DDX3X從胞質(zhì)易位到胞核。這進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)了 DDX3X 在促進(jìn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡過(guò)程中作為調(diào)節(jié)因子的關(guān)鍵作用。

機(jī)制上，通過(guò)體外轉(zhuǎn)染 DDX3XΔNLS 質(zhì)粒（表達(dá)了缺失核定位信號(hào)的 DDX3X），肝細(xì)胞存活率明顯提高，而CHOP的表達(dá)含量降低。CHOP 作為一種關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄因子，參與 ER 應(yīng)激誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。由 CHOP 啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)和ChIP 檢測(cè)進(jìn)一步表明，DDX3X易位是通過(guò)轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo)CHOP促進(jìn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。此外，DDX3X在乙肝相關(guān)肝衰竭和自身免疫性肝炎患者中升高并易位到細(xì)胞核中也進(jìn)一步證實(shí)了研究結(jié)論。

在ConA誘導(dǎo)的肝損傷過(guò)程中，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脅迫下DDX3X表達(dá)含量增加且從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核。DDX3X從胞質(zhì)到胞核的易位轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo)CHOP的表達(dá)進(jìn)一步促進(jìn)細(xì)胞凋亡。該研究闡明了DDX3X 介導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的確切機(jī)制，強(qiáng)調(diào)了DDX3X可能是免疫介導(dǎo)性肝損傷的潛在治療靶點(diǎn)。