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北京佑安醫(yī)院研發(fā)肝癌標(biāo)志物蛋白診斷芯片——幾滴血就能篩查肝癌

作者:張愛英 瀏覽次數(shù):
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目前,北京佑安醫(yī)院研究開發(fā)的肝癌標(biāo)志物蛋白診斷芯片技術(shù)已經(jīng)申請(qǐng)了國內(nèi)及美國,日本和加拿大專利,并且發(fā)表了SCI文章,同時(shí)在申請(qǐng)注冊(cè)院內(nèi)和國內(nèi)試劑。該技術(shù)是將生物芯片技術(shù)應(yīng)用到臨床血清樣本檢測中,檢測甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白異質(zhì)體(AFP-L3)、脫α- 羧基凝血酶原(DCP)、磷脂?;嫉鞍拙厶?/span>3(GPC-3)、高爾基Ⅱ型跨膜蛋白(GP-73D等肝癌相關(guān)血清標(biāo)志物。 不久的將來,該芯片技術(shù)將會(huì)應(yīng)用于臨床,使廣大患者通過極少量的血,經(jīng)過三個(gè)小時(shí)就能篩查肝癌。

肝細(xì)胞癌是全球最常見的惡性腫瘤之一,我國是乙肝大國,肝癌發(fā)病率占全球總數(shù)的55%。臨床上肝癌的診斷主要是通過血清檢測AFP, B超發(fā)現(xiàn)肝臟結(jié)節(jié),然后CT MRI 檢查,然而AFP 陽性率約6070%,至少有30%肝癌患者AFP檢測結(jié)果陰性,導(dǎo)致臨床80%患者確診時(shí)已屬中晚期。近30年來的治療方法,中晚期肝癌的5年以上長期生存率僅為10%左右。

AFP不能作為早期肝癌診斷的唯一指標(biāo),近年來國際公認(rèn)的具有肝癌診斷潛力的腫瘤標(biāo)志物包括AFP-L3DCP, GP73 GPC3等標(biāo)志物。將上述5項(xiàng)標(biāo)志物組合成復(fù)合型指標(biāo)對(duì)肝癌進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察,能夠大幅提高肝癌晚期診斷的正確率,甚至可提高肝癌早期診斷符合率,以及治療效果和預(yù)后的評(píng)估。

腫瘤標(biāo)志物的臨床檢測包括ELISA方法,均為單項(xiàng)或少數(shù)幾項(xiàng)分別檢查,需血量大、檢測時(shí)間長、程序繁雜、費(fèi)用高,不利于臨床大規(guī)模篩查。蛋白芯片方法具有費(fèi)用低, 檢測時(shí)間短,僅需要微量血液就能獲得結(jié)果等優(yōu)點(diǎn),并切提高了準(zhǔn)確性。

在研發(fā)肝癌標(biāo)志物蛋白芯片的過程中, 該團(tuán)隊(duì)創(chuàng)新性的將肝癌血清進(jìn)行臨床分期(8期)隊(duì)列研究,復(fù)合型標(biāo)志物芯片從多個(gè)方面同時(shí)觀察臨床分期隊(duì)列,提高了效率,降低了成本,提高了診斷精確性,對(duì)肝癌的診斷、療效觀察、預(yù)后判斷及治療后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移監(jiān)測提供更多可利用的信息。

甲胎蛋白AFP 由于其糖鏈的不同,分為三個(gè)異質(zhì)體,AFP-L1AFP-L2,AFP-L3。目前AFP-L3的檢查技術(shù)要求高、操作繁瑣、試劑昂貴。傳統(tǒng)的芯片方法可以檢測到AFP,  但是檢測不出AFP-L3含量。 然而,AFP-L3是肝癌的一項(xiàng)重要標(biāo)志物。北京佑安醫(yī)院和北京大學(xué)聯(lián)合開發(fā)研究用凝集素成功的研發(fā)出芯片方法檢測AFP-L3。同時(shí),北京佑安醫(yī)院肝病研究所和北京大學(xué)、軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院聯(lián)合,歷經(jīng)3年時(shí)間,經(jīng)過反復(fù)的實(shí)驗(yàn),完成了甲胎蛋白(AFP)、脫α- 羧基凝血酶原(DCP)、磷脂酰基醇蛋白聚糖3(GPC-3)、高爾基Ⅱ型跨膜蛋白(GP-73)蛋白芯片的制備。

AFPAFP-L3 、DCP、 GP73、GPC3五項(xiàng)標(biāo)志物,臨床上現(xiàn)用的ELISA 檢查方法,大概需要血清400ul,檢測費(fèi)成本500元,檢測時(shí)間長達(dá)16小時(shí)。而北京佑安醫(yī)院研制成功的芯片技術(shù)檢測上述5項(xiàng)標(biāo)志物成本總計(jì)50元,需要血清是原檢測方法的5%,只需要20 ul,只需3個(gè)小時(shí)的檢測時(shí)長。

生物芯片技術(shù)是一種高通量、高敏感、高特異性、省時(shí)、經(jīng)濟(jì),且微型化的蛋白質(zhì)分析技術(shù),將該技術(shù)成功的應(yīng)用的到臨床檢測中,將最小化患者由于抽血化驗(yàn)帶來的痛苦,減輕患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),同時(shí)也極大程度的減輕臨床技術(shù)人員的工作負(fù)擔(dān)。是一項(xiàng)更加經(jīng)濟(jì),便捷,有效的方法,會(huì)給廣大的患者帶來更大的福音。