近日，北京佑安醫(yī)院，北京市肝病研究所科研團(tuán)隊(duì)研究的“應(yīng)用蛋白芯片進(jìn)行肝癌標(biāo)志物的血清學(xué)檢測(cè)”創(chuàng)新成果發(fā)表在《Nature》 旗下的子刊《Scientificreports》 ，該文章的第一作者為北京佑安醫(yī)院、北京市肝病研究所副研究員張愛(ài)英，通訊作者為北京佑安醫(yī)院院長(zhǎng)，北京市肝病研究所所長(zhǎng)李寧。該成果已經(jīng)獲得了中國(guó)專利和兩項(xiàng)澳大利亞專利.該創(chuàng)新成果還申請(qǐng)了美國(guó)專利，日本專利，加拿大專利，目前正在審批中。

肝細(xì)胞癌（ HCC）是全球最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，我國(guó)肝癌發(fā)病率占全球總數(shù)的55%。近80%患者確診時(shí)已屬中晚期。肝細(xì)胞癌的早期診斷及診斷方法的建立一直是肝癌研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)和難點(diǎn)問(wèn)題。在肝癌診斷研究領(lǐng)域，血清腫瘤分子標(biāo)志物一直受到普遍關(guān)注。甲胎蛋白(AFP) 甲胎蛋白異質(zhì)體（AFP-L3）是目前公認(rèn)的具有肝癌診斷潛力的標(biāo)志物。AFP 根據(jù)其（巖藻糖基）對(duì)小扁豆凝集素的親和力不同可以分為 AFP- L1、AFP-L2 和 AFP-L3。其中 AFP-L1 主要來(lái)自于良性肝病，AFP-L2 主要來(lái)源于孕婦，而AFP–L3是甲胎蛋白的巖藻糖糖基化形式，主要來(lái)源于HCC。AFP-L3在肝癌的早期診斷、鑒別診斷、療效評(píng)估和預(yù)后監(jiān)測(cè)等方面均具有較高的特異性與敏感性。至此，北京佑安醫(yī)院、北京市肝病研究所經(jīng)過(guò)2年的反復(fù)試驗(yàn)，巧妙地利用了血清中AFP和AFP-L3之間微小的結(jié)構(gòu)差異，又利用了AFP-L3和AFP識(shí)別相同抗體的特點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)在“同一滴血清樣品”中“AFP-L3和AFP”的“同時(shí)、同條件、同試劑”檢測(cè)，極大的簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作，同時(shí)獲得血清中結(jié)構(gòu)差異非常小的兩種物質(zhì)AFP和AFP-L3的濃度水平，從而得到AFP糖蛋白巖藻糖指數(shù)，幫助確診肝癌。目前，這種同時(shí)檢測(cè)AFP和AFP-L3的方法只有日本能夠開(kāi)展，但日本的檢測(cè)費(fèi)用、需要的血清量和檢測(cè)程序都遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于應(yīng)用蛋白芯片進(jìn)行肝癌標(biāo)志物的血清學(xué)檢測(cè)。該團(tuán)隊(duì)的蛋白芯片方法同時(shí)一次性檢測(cè)AFP和AFPL3屬國(guó)際首創(chuàng)。

北京佑安醫(yī)院研究團(tuán)隊(duì)對(duì)蛋白芯片檢測(cè)方法和傳統(tǒng)酶聯(lián)檢測(cè)方法進(jìn)行對(duì)比，當(dāng)AFP的cut-off值設(shè)定為20ng/ml，蛋白芯片方法診斷肝癌的敏感性為89.74％，特異性為100％；ELISA方法診斷肝癌的敏感性為87.17％和100％的特異性。當(dāng)AFP-L3％-cut off值設(shè)定為0.1，蛋白芯片方法診斷肝癌的敏感性為56.41％，特異性為100％;ELISA方法的敏感性為53.84％，特異性為100％。AFP蛋白芯片和ELISA特異性和敏感性沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

與傳統(tǒng)的ELISA 方法相比較，抗體芯片具有省時(shí)、經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確、便捷及高通量等特點(diǎn)。首先，抗體芯片檢只需要血清樣本10 ul，ELISA方法檢測(cè)需50 ul，降低了臨床檢測(cè)對(duì)患者造成的創(chuàng)傷；其次，抗體芯只需要1-1.5小時(shí)，ELISA方法檢測(cè)至少需3小時(shí)，減少了診斷時(shí)間；第三，抗體芯片方法所需要的費(fèi)用約是ELISA方法的1/6，大大減輕了患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，最后，蛋白新配方法操作簡(jiǎn)單，減輕了醫(yī)務(wù)人員的工作負(fù)擔(dān)。

本研究基于本血清標(biāo)志物診斷領(lǐng)域在AFP與AFP-L3的定量檢測(cè)技術(shù)的需求及空白，提供的一種適合于定量檢測(cè)生物樣品中甲胎蛋白和/或巖藻糖基化甲胎蛋白的檢測(cè)方法。不久的將來(lái)，該成果將轉(zhuǎn)化應(yīng)用于臨床，期望給廣大的患者帶來(lái)福音。